摘要:
本试验目的是探讨乙酰化抑制剂——曲古菌素A (TSA)对延边奶山羊耳成纤维细胞活力、形态及凋亡的影响.添加0.05、0.01、0.05和0.10 μmol/LTSA处理延边奶山羊耳成纤维细胞24、48、72和96 h后,应用MTT法检测细胞活力,并观察细胞形态变化,应用Hochest33342/PI染色检测细胞凋亡状况.结果表明,TSA对延边奶山羊耳成纤维细胞活力的影响呈现一定的浓度和时间依赖性,低浓度的TSA对细胞的毒性较少,其中0.005μmol/L TSA处理细胞培养24h可促进延边奶山羊耳成纤维细胞增殖(P<0.05),并且对细胞的形态未产生影响;但是随着浓度的增加和作用时间的延长,TSA抑制延边奶山羊耳成纤维细胞的增殖,细胞活力下降,细胞失去原有的梭形,贴壁蛋白脱落,检测到明显的凋亡.因而,可以选用0.005 μmol/L TSA处理延边奶山羊耳成纤维细胞24 h来进行后续转基因试验.