摘要:
利用正交试验对影响RAPD—PCR反应体系的各种因素进行研究,从而建立适合杜鹃花融姬D反应的最佳反应体系,最终选择杜鹃基因组RAPD—PCR的最佳扩增反应体系,即模板DNA80ng、随机引物0.5μmol/L、dNTPs 1.1mmol/L、MgCl22.5mmol/L,1.2μmol/LTag-DNA聚合酶,buffer 2μl,总反应体系20μL。试验设计的6个因子、5个水平中,Mg^2+、dNTPs和引物的浓度是主要因子,其中Mg^2+的浓度对试验的影响最大,dNTPs和引物浓度在较低的水平就可满足需要,高浓度并没有显著提高试验效果。