摘要:
应用RT-PCR和RACE技术克隆得到cDNA全长1797 bp的黄秋葵（Hibiscus esculentus L.）番茄红素β-环化酶基因LCYB,开放阅读框（ORF）包含1509个碱基;预测编码503个氨基酸,理论分子量（Mw）为56.288 kD,等电点（p I）为4.577;编码的蛋白与陆地棉（Gossypium hirsutum L.）、黄麻（Corchorus capsularis L.）和可可（Theobroma cacao L.）同源蛋白的相似性均在88%以上,显示其高度的保守性,将基因命名为HeLCYB,GenBank登录号为：KX257998。Motif Scan分析显示,蛋白氨基酸序列88-481位为HeLCYB保守结构域,并在88-113位含有1个FAD结合域。通过荧光定量PCR分析表明,HeLCYB基因在黄秋葵根、茎、叶、花和果荚中均有表达;叶片生长中以成熟叶中表达最高,果实发育中以花后7d高表达。建立与优化了黄秋葵类胡萝卜素超高效液相检测体系,结果显示黄秋葵中主要含有β-胡萝卜素和叶黄素。β-胡萝卜素在成熟叶中含量最高,果实以花后7 d含量最高,与HeLCYB基因的表达呈正相关。本研究揭示了HeLCYB基因表达和类胡萝卜素积累的特性,为开展黄秋葵类胡萝卜素分子调控机制研究奠定了基础。
