摘要:
目的 观察竹节香附素A对人肝癌细胞株Hep G2细胞血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法 体外培养Hep G2细胞,将不同浓度的竹节香附素A与Hep G2细胞共培养,采用酶联免疫吸附（ELISA）方法检测不同浓度竹节香附素A处理Hep G2细胞24 h后细胞培养上清液中VEGF蛋白含量的变化;半定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法和蛋白免疫印迹（Western blot）法分别检测竹节香附素A对Hep G2细胞VEGF mRNA和蛋白相对表达水平（阳性条带灰度值/β-actin带灰度值）的影响。结果 （1）不同浓度（5、10、20μg/ml）竹节香附素A处理Hep G2细胞24 h后,细胞培养上清液中VEGF水平呈剂量依赖性降低（P=0.000）。（2）竹节香附素A对Hep G2细胞VEGF mRNA表达的影响：（1）不同浓度竹节香附素A（0、5、10、20μg/ml）处理Hep G2细胞24 h后,VEGF mRNA的相对表达量呈剂量依赖性减少（0.96±0.07、0.75±0.09、0.55±0.10、0.32±0.11,P=0.000）。（2）10μg/ml竹节香附素A分别处理Hep G2细胞0、6、12、24 h后,VEGF mRNA的相对表达水平呈时间依赖性下降（0.77±0.05、0.53±0.09、0.32±0.12、0.15±0.04,P=0.000）。（3）竹节香附素A抑制Hep G2细胞VEGF蛋白的表达：（1）不同浓度竹节香附素A（0、5、10、20μg/ml）处理Hep G2细胞24 h后,VEGF蛋白相对表达水平呈剂量依赖性下降（2.08±0.28、1.43±0.22、0.72±0.15、0.17±0.10,P=0.000）。（2）10μg/ml竹节香附素A分别处理Hep G2细胞0、6、12、24 h后VEGF蛋白相对表达水平呈时间依赖性减少（2.47±0.05、1.36±0.02、0.30±0.02、0.07±0.02,P=0.000）。结论 竹节香附素A能够下调Hep G2细胞VEGF表达,这可能是其抑制肝癌细胞生长增殖的重要机制之一。
