摘要:
采用RDP试剂(改进自Chomczynski and Sacchi 1987)提取锯缘青蟹精巢和卵巢的总RNA,经oligotex试剂盒纯化得到mRNA.利用SMART(switching mechanism at 5'end of RNA transcript)技术,构建成精巢和卵巢的全长cDNA文库.在构建好的文库中,精巢的文库含有约1.45×106的重组子,卵巢的文库含有约为1.75×106的重组子.插入cDNA长度为500 bp~3kb,说明两文库均具有良好的质量,为进一步筛选、克隆精巢与卵巢特异表达基因奠定了基础.