摘要:
通过生物信息学手段分析cyp51基因结构，并根据GenBank登记的玉米黑粉菌cyp51DNA序列，设计cyp51引物和两对分别截短不同跨膜区的突变体引物，构建了多种重组表达质粒及突变体重组表达质粒。选用不同宿主菌包括Escherichia coli BL21（DE3）、BL21（DE3）pLysS和Rosetta（DE3）诱导表达并优化条件。SDS—PAGE分析结果表明：只有突变体pET32-YH-35能够在E．coli BL21（DE3）中高效表达（30℃，0．5mmol／L IPTG诱导）。通过与戊唑醇等4种商品化杀菌剂农药和14种XF系列农药先导化合物的紫外结合光谱分析表明：重组蛋白具有生物学活性。其中一种XF系列化合物的结合常数接近商品化杀菌剂，有可能开发为新的杀菌剂，为设计开发新型高效抗真菌新药提供了理论依据。
