摘要:
目的建立人涎腺粘液表皮样癌细胞系耐药细胞株并观察其生物学特性及耐药性能. 方法采用浓度递增法长期不间断诱导并经克隆化筛选,建立稳定的人涎腺粘液表皮样癌细胞系耐药细胞株(MEC-1/5-FU). 应用MTT法、细胞计数法、软琼脂克隆形成试验、流式细胞术、免疫组化、电镜等方法观察及检测该细胞株的生物学特性、耐药性能及参数. 结果倒置显微镜观察该耐药细胞和其亲本涎腺粘液表皮样癌细胞系(MEC-1)的细胞生长活跃,MEC-1为单层贴壁生长于培养器皿中,MEC-1/5-FU则可见重叠生长,两种细胞形态及超微结构未见明显改变. MEC-1/5-FU和MEC-1细胞的群体倍增时间分别为28.8 h和30.0 h;克隆形成率分别为4.9%和1.2%;细胞周期分布S期细胞分别为25.4%和17.1%. MEC-1/5-FU耐药性能稳定,给药剂量已达1.980 μg*L-1. 12种化疗药物对MEC-1/5-FU和MEC-1生长抑制作用的剂量效应参数显示:耐药细胞诱导作用药物5-FU 对MEC-1/5-FU细胞和MEC-1的半抑制浓度(IC50)值分别为6.310 μg*L-1和0.447 μg*L-1,耐药倍数为14.1;药物敏感性试验结果同时可见该耐药细胞株对VCR, VBL, PYM, DNR, VP16, CODP, PADM等化疗药物的IC50较MEC-1表现不同程度的耐药性,其耐药倍数分别为14.1, 7.1, 7.9, 5.3, 3.6, 3.2, 2.5. 免疫组化结果显示:P-gp蛋白在耐药细胞株MEC-1/5-FU呈阳性表达,而在MEC-1则未见表达. 结论 MEC-1/5-FU细胞经长期药物诱导及筛选具有多药耐药特性,为一株耐药细胞株.
