摘要:
目的：克隆F13型致肾盂肾炎大肠杆菌（UPEC）132株的粘附素基因papG并作序列分析。方法：根据I型papG(papGJ96)和Ⅱ型papG(papGIA2)基因序列设计3条引物，PG2和PG3分别为下游3端引物，PG1为两型papG上游5’端共用引物，并在各引物5’端加入限制性内切酶位点，以UPEC132染色体DNA为模板进行PCR扩增，将扩增产物克隆入质粒载体，筛选阳性重组质粒作序列分析。结果：UPEC132株以I型PapG引物扩增时为阴性结果,以Ⅱ型papG引物扩增时可获得约1100bp的DNA片段。扩增产物经克隆获得阳性重组质粒pGC39和pGC103,对其序列分析显示papG132编码337个氨基酸，与pagGJ96的同源性仅为45％，而与papGIA2的同源性为98．6％，与papGIA2比较，papG132核苷酸序列＋3位缺失1个三联体密码，并在特异性受体结合域＋49位，＋160位和PapD蛋白亚单位作用区＋272，＋314位存在错义突变，此外还存在7处同义突变，结论：UPEC132株的P菌毛不同于相同血清型的UPEC J96株，前者为F13型papA与Ⅱ型papG组合，后者为F13型papA与I型papG组合，Ⅱ型papG粘附力较强，具有重要的临床意义。
