摘要:
目的建立快速、简便诊断多房棘球蚴病的胶体金免疫层析试条方法。方法提取多房棘球蚴原头节总RNA,通过RT-PCR获得编码Em18基因片段并克隆入pGEX-3X表达载体,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达得到重组蛋白;采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,标记抗人IgG单克隆抗体;将重组Em18抗原包被于硝酸纤维素膜适当位置,制成检测特异抗体的胶体金免疫层析试条。用该试条检测多房棘球蚴病（56份）、细粒棘球蚴病（87份）、囊尾蚴病（30份）、日本血吸虫病（10份）和弓形虫病（10份）患者血清,以及健康人（50份）血清,以评价其检测的敏感性和特异性,同时用ELISA法进行平行检测,以评价该试条的诊断性能。结果以重组蛋白Em18为抗原胶体金免疫层析试条检测多房棘球蚴病患者血清,敏感性为92.9%（52/56）。与细粒棘球蚴病和囊尾蚴病患者血清分别存在9.2%（8/87）和3.3%（1/30）的交叉反应,与健康人血清存在8.0%（4/50）的假阳性率,与日本血吸虫病和弓形虫病患者血清则无交叉反应,特异性为93.0%（174/187）。ELISA法检测的敏感性和特异性分别为94.6%（54/56）和92%（172/187）,与试条法比较两者差异均无统计学意义（P〉0.05）。kappa分析结果显示,试条法与ELISA法检测多房棘球蚴病患者血清的结果高度一致（κ=0.98）。结论以重组Em18抗原建立的快速诊断胶体金免疫层析试条,检测多房棘球蚴病的敏感性和特异性均较高。
