摘要:
目的研制适于常规免疫学检验的蛋白质分子微阵列.方法利用分子组装技术,以琼脂糖凝胶为基质,于玻片表面制成自组装膜,经过碘酸钠氧化后再与戊二醛分子偶联,而成为具有双功能分子层的薄膜.基片表面衍生的醛基可与各类抗原(如重组多肽、磷脂和DNA)、辣根过氧化物酶及抗体分子中的氨基形成Schiff′s 碱共价连接.结果基于上述原理,制作生物分子微阵列,优选出IgG分子的最佳点样浓度为100 μg/ml, 点样量以50 nl为宜.通过不同的实验模式,成功地在基片表面建立了酶免疫检测体系,可敏感特异地检出抗原、抗体分子及酶与底物之间的相互作用.结论该法最突出的优点在于减少了样本和试剂用量,可对多种自身抗体实施高通量的平行分析,以酶-底物(HRP-DAB-H2O2)作为芯片信号显示系统,结果较为直观,具有较大的实用性和应用前景.
