摘要:
目的观察鼠疫耶尔森菌F1抗原（F1Ag）单克隆抗体制备过程中，FIAg免疫Balb／c小鼠的免疫剂量和方法，探索操作性强、用时短和免疫效果好的方法。方法7～9周龄Balb／c小鼠48只．按体质量随机分成6组：150、100、50、25ug组（第1次接种为皮下多点注射，F1Ag分别为150、100、50、25ug，第2、3次接种分别为皮下多点注射和腹腔注射，F1Ag量均为100ug）、皮下接种组（3次F1Ag接种均采用皮下多点注射，每次100txg）、腹腔接种组（3次F1Ag接种均采用腹腔注射，每次100ug），每组8只。首次免疫接种F1Ag＋等量弗氏完全佐剂（CFA）的乳化剂；3周后第2次接种F1Ag＋等量弗氏不完全佐剂（IFA）的乳化剂；1周后第3次接种F1Ag（不加佐剂）；1周后取小鼠尾血，用双抗原夹心酶联免疫吸附试验（DAgS—ELISA）和间接血球凝集试验（IHA）微量法检测F1抗体。结果不同剂量（150、100、50、25Ixg）组小鼠血清F1抗体效价（DAgS-ELISA法：G=12173．87、13440．37、15024．19、4466．72；IHA微量法：G=19972．32、18089．40、23170．47、4871．08）比较，差异有统计学意义（DAgS—ELISA法：F=3．11，P〈0．05；IHA微量法：F=4．11，P〈0．05）。150、100、50ug组小鼠血清F1抗体效价明显高于25ug组（DAgS—ELISA法：t值分别为2．18、2．39、2．73，P〈0．05；IHA法：t值分别为2．54、2．73、3．13，P〈0．05）。不同接种途径条件下，皮下注射组、腹腔接种组、100ug组小鼠血清F1抗体效价呈渐次增高趋势（DAgS—ELISA法：G：8933．44、9986．16、13440．37；IHA微量法：G=13777．25、16384．00、18089．40），但差异无统计学意义（F值分别为0．66、0．25，P〉0．05）。结论F1Ag免疫小鼠首次皮下多点注射50ug，加强免疫（腹腔注射）100ug，可以缩短整个免疫周期，免疫效果良好，抗体水平较高。
