毛木耳漆酶纯化及其部分漆酶特性的研究

《菌物学报》 杨建明 [1];张小敏 [2];邢增涛 [3];陈明杰 [2];曹晖 [2];谭琦 [2];潘迎捷 [2]
摘要:
对毛木耳Auricularia polytricha AP4的粗酶液进行PAGE电泳后发现含有三种漆酶同工酶,并且通过运用Native SDS-PAGE获得三种漆酶的分子量大小分别约为:LacA (110kD); LacB (84kD); LacC (65kD).对漆酶粗酶液通过硫酸铵分级沉淀和离子交换柱层析进行纯化,用SDS-PAGE证明获得纯化的单一漆酶 LacB.LacB漆酶的反应的最适温度为30℃,最适pH为3.0.此酶氧化ABTS 的Km值为6.64×10-5mmol/L,金属离子对酶活的影响很大,其中Ca2+,Mg2+,Zn2+,Na2+,Ag2+对漆酶LacB有明显的激活作用;Co2+, Hg2+, Fe3+, Fe2+, Ba2+ 等对酶活有明显的抑制作用.LacB和其它真菌漆酶一样具有底物专一性不强的特点,并且LacB对RB亮兰染料有很好的脱色作用.
真菌漆酶 , 纯化 , 最适pH , 最适温度 , 酶活 , PAGE电泳 , SDS-PAGE , 离子交换柱层析 , 抑制作用 , 激活作用
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