摘要:
目的探讨竹节香附素A（RA）抑制HCT116细胞的增殖及其相关机制。方法利用四甲基偶氮唑蓝（MTT）检测RA对HCT116细胞的增殖抑制;流式细胞术（FCM）检测RA对细胞凋亡的影响;透射电镜观察RA诱导自噬;Western blot检测凋亡、自噬相关蛋白表达。结果 RA能够明显抑制HCT116细胞的增殖,并呈浓度、时间依赖性。透射电镜观察到双层膜自噬体的存在;FCM显示RA能够诱导HCT116细胞凋亡,且随着浓度的增大凋亡率增加。Western blot检测显示,自噬相关蛋白Beclin-1、微管相关蛋白1轻链3（LC3）表达增高;抑制凋亡蛋白Bcl-2表达减少;而促凋亡蛋白Bax,凋亡相关蛋白Cleaved-caspase-3、Cleaved-聚二磷酸腺苷核糖多聚酶（PARP）表达增加;RAPA靶蛋白（mTOR）信号通路中mTOR蛋白表达增加,磷酸化mTOR（p-mTOR）蛋白表达减少。加入mTOR通路抑制剂雷帕霉素（RAPA）后Beclin-1、LC3蛋白表达增加,凋亡率增加,且Cleaved-caspase-3、Cleaved-PARP表达也增加。结论 RA能够抑制肠癌细胞HCT116的增殖;并能诱导细胞自噬和凋亡,其机制可能是通过调控mTOR信号通路实现。
