摘要:
目的观察竹节香附素A（RA）对人结肠癌HT29细胞凋亡及周期的影响，并探讨其相关机制。方法1、2、4、8、16μmol／L的RA分别作用细胞12、24、48h，四甲基偶氮唑蓝（MTT）实验检测RA对HT29细胞的增殖抑制作用，计算半数抑制浓度1C50；荧光显微镜下观察Hoechst33258染色，RA对细胞凋亡形态学的影响；流式细胞术（FCM）检测RA对HT29细胞凋亡及细胞周期的影响；蛋白质印迹法（Westernblot，WB）检测Cleaved—caspase-3、Cleaved—PARP、CyclinB、CDKl等蛋白的表达情况。结果竹节香附素A能够抑制HT29细胞的增殖，并与浓度、时间呈正相关（P〈0．05），12、24、48hIC50分别为为（9．31±0．63）μmol／L，（4．88±1．02）μmol／L，（3．60±0．89）μmol／L。Hochest33258染色发现细胞出现核固缩、核碎裂；流式细胞术显示：随着给药浓度的增大凋亡率逐渐增加（P〈0．05）；WB结果显示Cleaved—caspase-3、Cleaved—PARP蛋白表达增加。竹节香附素A作用于HT29细胞后，与对照组相比，G2／M期细胞比例逐渐增高；且CyclinB、CDKl蛋白表达随着给药浓度的增大而减少。信号通路P13K／AKT中P13K、AKT蛋白表达上调，p-P13K、p-AKT表达下调。结论RA能够抑制肠癌HT29细胞的增殖，其机制可能是通过调控P13K／AKT信号通路诱导细胞凋亡和阻滞细胞周期实现的。
