摘要:
目的建立半套式PCR和DNA探针技术由于检测Q热立克次体.方法依据已知的Q热立克次体的16S和23S rRNA基因及其间区的序列,设计3条引物,建立了扩增16S-23S rRNA基因间区的半套式PCR方法,并将扩增片段制成探针,建立了斑点杂交技术.结果 10株Q热立克次体分离株均可扩增出572 bp的PCR条带,而对照菌都为阴性,此半套式PCR方法的灵敏度高达1 pg;用九里株扩增片段标记后制成的探针,与10个Q热立克次体分离株的全DNA呈阳性杂交,对照菌为阴性,此杂交方法的灵敏度为0.5 ng.结论基于Q热立克次体16S-23S rRNA基因间区的半套式PCR和DNA探针技术具有较好的特异性和灵敏度,可联合应用于Q热的病原学诊断.
