摘要:
随着酶制剂在养殖业中应用日益增多,产品质量也参差不齐,市场上时有低劣酶制剂出现,而酶制剂酶活的测定比较繁琐,有关酶活的定义、测定方法、测定条件尚不统一,给广大用户在选购和使用时造成很多不便,难免上当受骗造成不必要的经济损失。本文就蛋白酶(中性蛋白酶和酸性蛋白酶)和淀粉酶活力简便、快速测定方法简介如下:
1 蛋白酶活力的测定
1.1 原理采用福林-酚试剂法。福林-酚试剂在碱性条件下可被酚类化合物还原呈蓝色(钼蓝和钨蓝混合物),由于蛋白质分子中有含酚基的氨基酸(如酪氨酸、色氨酸等),可使蛋白质及其水解产物呈上述反应。因此可利用此原理测定蛋白酶活力。通常以酪蛋白为底物,在一定pH值和温度条件下,同酶液反应,经一段时间后终止酶促反应,经离心或过滤除去酪蛋白等沉淀物后取上清液,用Na2CO3碱化,再加入福林-酚试剂显色,蓝色的深浅与滤液中生成产物酪氨酸量成正比;酪氨酸含量用分光光度计在660 nm波长处测定,从而计算出蛋白酶的活力。