摘要:
【目的】探讨天然产物漆黄素抗宫颈癌细胞生长及其分子作用机制。【方法】以人宫颈癌Hela细胞为模型，将漆黄素作用于细胞，利用MTF、PI以及AnnexinV方法观察细胞的生长和凋亡情况，通过Westernblot、RT—PCR以及免疫荧光方法分别考察凋亡相关信号通路的关键蛋白caspase和Apaf-1的表达水平和活性变化．ERK／MAPK信号通路中ERKl／2蛋白的磷酸化水平的变化，以及COX-2蛋白和PGE2的表达水平的变化，并通过使用小分子抑制剂和RNA干扰技术等方法进-步分析上述关键蛋白在漆黄素抗肿瘤细胞生长中的作用。【结果】漆黄素（当作用浓度为80—200Ixmol／L时）可显著抑制20％～48％Hela细胞增殖和（当作用浓度为100～200p．mol／L时）显著诱导细胞凋亡；使Caspase-3和Caspase．9的蛋白酶活性分别增加20％～50％和22％～38％；促进Apafl蛋白的表达；能有效诱导Cytochrome．C的释放；降低ERK／MAPK信号通路中ERK1／2蛋白的磷酸化水平；与ERK抑制剂或siRNA联合使用可抑制60％～70％细胞增殖；减少COX-2蛋白的表达；明显减少PGE2的产生，仅1800—2600pg／mL；减少p300、NF．KB、p50、p65与COX-2启动子的结合，与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。【结论】漆黄素通过调控Apaf-1、ERK和COX-2的分子机制来诱导宫颈癌Hela细胞的凋亡及抑制细胞生长。
