摘要:
目的探讨先天性软骨发育不全（ACH）的产前快速基因诊断方法。方法选择2007年5—11月南京大学医学院附属鼓楼医院妇产科产前诊断中心收治的3个ACH家系：其中家系1为年龄6个月的ACH患儿；家系2为妊娠18周的孕妇，待采集胎儿羊水细胞进行产前诊断；家系3为孕39周经超声诊断为ACH的胎儿，待采集脐带血进行诊断。同时采用限制性内切酶（Sfc Ⅰ和Msp Ⅰ）酶切、变性高效液相色谱（DHPLC）分析及序列分析3种检测方法，对外周静脉血或脐血中的成纤维细胞生长因子受体3（FGFR3）基因进行突变检测。结果（1）DHPLC分析：家系1患者的色谱分析结果为异源双链杂合峰，家系2患者和胎儿的结果均为异源双峰，家系3胎儿的结果为异源双峰，正常对照的结果为同源单峰。（2）FGFR3基因10号外显子PCR产物酶切前的聚丙烯酰胺凝胶电泳检测结果：家系1患者、家系2患者及胎儿的PCR产物经Sfc Ⅰ酶切后除有247bp条带外，还产生162和85bp两个酶切产物条带，但不能被Msp Ⅰ酶切，且只有247bp 1条产物条带。家系3胎儿PCR产物不能被Sfc Ⅰ酶切，但经Msp Ⅰ酶切后可出现162和85bp两个产物条带。正常对照PCR产物均不能被Sfc Ⅰ和Msp Ⅰ酶切。（3）PCR产物测序结果：家系1患者PCR产物经测序发现FGFR3基因1138 G→A杂合子突变，家系2患者及胎儿也均为FGFR3基因1138 G→A杂合子突变，家系3胎儿为FGFR3基因1138Gc杂合子突变，正常对照在FGFR3基因1138位点为G纯合子。家系2胎儿以上各项检测结果均与家系2患者相同，是遗传母亲致病突变基因的结果。结论DHPLC和限制性内切酶酶切分析均能准确检测致病突变的FGFR3基因，但DHPLC技术操作方便快捷、准确，而且敏感性更高，可在临床上推广用于ACH的产前快速基因诊断。
